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使用Porvair 微孔板制備用于分析THC/CBD的大-麻植物樣品

更新時(shí)間:2021-03-26瀏覽:1511次

隨著用于醫(yī)學(xué)和研究目的的大-麻合法化程度的提高,對其活性成分進(jìn)行準(zhǔn)確,高通量分析的需求急劇增加。

最重要的兩個是具有治療用途的精神活性THC和止痛CBD。 THCCBD的比例對于區(qū)分藥用大-麻和休閑大-麻至關(guān)重要。這個比例對稅務(wù)部門,醫(yī)療監(jiān)管者和種植者都非常重要。

THC / CBD比率的確定

準(zhǔn)確測定THC / CBD的比例至關(guān)重要,這是通過對大-麻葉,芽和花的樣品進(jìn)行有效的樣品制備來確定的。傳統(tǒng)的樣品制備方法已使用拍打或研磨機(jī)將這些材料均質(zhì)化。當(dāng)在聚丙烯微孔板中進(jìn)行操作時(shí),這些機(jī)器施加的極-端壓力通常會損壞孔板,從而導(dǎo)致破裂,滲漏并最終導(dǎo)致交叉污染。分析的目的是確定總THC。

這包括無羧酸鹽形式(THCA)以及熱轉(zhuǎn)化形式THC。醫(yī)學(xué)價(jià)值是CBD含量的函數(shù),CBD含量必須再次總計(jì)才能包括天然羧酸形式。

高效液相色譜(HPLC)可以在將THCACBD的酸成分轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的游離形式的THCCBD之前鑒定它們的酸成分,因此首-選mouth劑和大-麻產(chǎn)品。

氣相色譜(GC)分析的一個缺點(diǎn)是熱注射器中THCATBDA的破壞,這可能會使THC / TBD比的最終數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。因此,HPLC / UVLC / MS應(yīng)該是首-選的分析方法。以下方法也可用于制劑和植物原料。

儀器與方法

Porvair Sciences 2ml深孔種子基因組微孔板219030

Porvair Sciences 96孔蓋墊219004

Porvair Sciences Microlute真空歧管228008

Porvair Sciences Microlute P3240100

具有96孔螺旋針頭的Porvair Sciences Minivap蒸發(fā)器(229206229072

具有3板適配器的Porvair Sciences Microshake微板振蕩器(229651229654

Porvair Sciences 2.2毫升方形深孔板(219009

實(shí)驗(yàn)室研磨機(jī)(例如Spex GenoGrinder

 

對于THC / CBD比率分析,應(yīng)隨機(jī)取樣大-麻葉,芽和花的樣品(如果有)。我們建議在Porvair 229030植物基因組板的每個孔中準(zhǔn)確稱量約50mg的干燥植物材料。

 3 x 3mm的鋼或鎳研磨球(如果研磨種子材料,則需要鎳)添加到植物基因組板中。

219004蓋墊密封板,然后將蓋好的板放入GenoGrinder中。

1500 rpm下研磨2分鐘。取下蓋墊,將干燥的地面粉末(應(yīng)通過1毫米篩子)轉(zhuǎn)移到Porvair P3濾微孔板(240100的每個孔中。

準(zhǔn)確添加400ul甲醇或異丙醇(根據(jù)需要)以溶解植物材料中的油性殘留物。

Porvair Microshake搖床(229651上用P3板適配器(229654或其他合適的搖床以330 rpm的速度攪拌10分鐘。

P3板中的超疏水玻璃料將防止泄漏,但為使您更加省心,可以使用可選的排水蓋墊,如果需要,應(yīng)在測定開始之前將其置于板的底面(219005)。

搖晃后,取下排液蓋,將P3板放置在Porvair Microlute歧管(228008)上,該歧管在氣室中具有2ml的收集板。該收集板可以是另一個種子基因組板(219030或標(biāo)準(zhǔn)的2ml方孔板(219009。任何SLAS / ANSI格式的深孔板均可用于收集步驟,但是219009219030使用的是無萃取聚丙烯,不會對要分析的溶液產(chǎn)生滲濾液。

此外,其板的幾何形狀已針對Porvair Microlute歧管進(jìn)行了優(yōu)化,因此無需進(jìn)一步調(diào)整即可防止孔之間的交叉污染。抽真空以將純化的提取液向下抽吸通過過濾器并進(jìn)入收集板的孔中。使用歧管上的閥隔離真空源,并使用針形閥釋放增壓室中的真空?,F(xiàn)在可以丟棄濾板,可以將含有有機(jī)提取物的收集板帶入HPLC進(jìn)行分析。

如果首-選分析總THCCBD,則需要執(zhí)行額外的步驟。在這種情況下,必須通過加熱將THCACBDA轉(zhuǎn)化為THCCBD。

2ml含有溶劑提取物的收集板,將其放在Porvair Minivap上。將溫度設(shè)置為最-高(60℃)并蒸發(fā)至干,繼續(xù)用熱氣加熱45分鐘,以使熱不穩(wěn)定的THCACBDA解離為THCCBD。冷卻至室溫后,將其重新懸浮在400ul的溶劑中,在微搖瓶上搖晃硅藻土以確保充分混合,然后進(jìn)行HPLC分析。

 

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